如果您使用增殖細(xì)胞作為研究的一部分，您將知道監(jiān)測(cè)其生長(zhǎng)速度的重要性。培養(yǎng)中的細(xì)胞以異常速率分裂，可能表明其生長(zhǎng)條件出現(xiàn)問(wèn)題，并可能影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效性，更不用說(shuō)留給您的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞太少了。

除了監(jiān)測(cè)培養(yǎng)中的細(xì)胞生長(zhǎng)外，許多實(shí)驗(yàn)還旨在比較以不同方式處理的細(xì)胞群的增殖或健康狀況。例如，您可能想知道通過(guò)比較處理和未處理細(xì)胞的增殖來(lái)了解新候選藥物對(duì)細(xì)胞分裂速率的影響。這些實(shí)驗(yàn)是如此常規(guī)，因此擁有一種每次都可以使用的簡(jiǎn)單、可靠的方法非常重要。訪問(wèn)科學(xué)文檔、方案、故障排除建議和其他資源對(duì)于確保您從所選方法中獲得最佳效果也至關(guān)重要。值得慶幸的是，有各種各樣的工具和技術(shù)可用于跟蹤細(xì)胞生長(zhǎng)，蕞hao的細(xì)胞增殖體外檢測(cè)器之一是 alamarBlue。我們將解釋了什么是 alamarBlue 以及它是如何工作的，然后探討了這種試劑的三個(gè)主要優(yōu)點(diǎn)。我們還將向您介紹有用的資源，以支持您使用 alamarBlue 的學(xué)習(xí)。

什么是 alamarBlue？

alamarBlue 含有細(xì)胞滲透性，無(wú)毒的 REDOX 指示染料刃天青。響應(yīng)細(xì)胞代謝，染料的顏色從弱熒光藍(lán)色變?yōu)閺?qiáng)熒光粉紅色（圖 1）。粉紅色熒光的強(qiáng)度與活的呼吸細(xì)胞的數(shù)量成正比; 因此，AlamarBlue 是細(xì)胞健康的直接指標(biāo)。

為何建議您使用 alamarBlue 進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測(cè)呢?

優(yōu)勢(shì)一：alamarBlue 無(wú)毒

與其他增殖試劑相比，alamarBlue 不會(huì)干擾電子傳遞鏈或影響細(xì)胞呼吸或功能，因此無(wú)毒且使用安全（O'Brien 等人，2000）。這也意味著 alamarBlue 可能比有毒化合物更容易獲得，用于教學(xué)實(shí)驗(yàn)室和項(xiàng)目學(xué)生的實(shí)驗(yàn)室。與有毒增殖劑不同，暴露于 alamarBlue 的細(xì)胞保持功能齊全，存活和健康，不受指示劑存在的影響。結(jié)合您不需要裂解細(xì)胞來(lái)測(cè)量 alamarBlue 活性的事實(shí)，您可以在測(cè)量增殖后保持細(xì)胞生長(zhǎng)，并在以后的時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行重復(fù)測(cè)量。這使得 alamarBlue 適合長(zhǎng)期的時(shí)間課程研究。

優(yōu)勢(shì) 2：alamarBlue 使用簡(jiǎn)單

alamarBlue 的工作流程很簡(jiǎn)單：將試劑添加到細(xì)胞中，孵育并測(cè)量（圖 2）。作為一種高度信任和引用的化合物，許多實(shí)用的建議、方案和已發(fā)表的實(shí)驗(yàn)可以為您提供支持。alamarBlue 與多種培養(yǎng)基兼容，因此在添加 alamarBlue 之前，您不需要更換細(xì)胞培養(yǎng)基。哺乳動(dòng)物細(xì)胞需要在標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)條件下與 alamarBlue 一起孵育至少 1-4 小時(shí)：在 37°C 和 pH 6.8 至 7.4 之間。作為細(xì)胞增殖讀數(shù)的顏色變化可以使用熒光或吸光度進(jìn)行測(cè)量，以蕞適合您的實(shí)驗(yàn)室為準(zhǔn)。在 570nm 和600nm 處監(jiān)測(cè)吸光度，在 530-560nm 激發(fā)波長(zhǎng)和 590nm 發(fā)射波長(zhǎng)處監(jiān)測(cè)熒光。然后，您可以使用簡(jiǎn)單的 alamarBlue 計(jì)算器來(lái)處理數(shù)字并指示細(xì)胞在時(shí)間范圍內(nèi)生長(zhǎng)的速度。

優(yōu)勢(shì) 3：alamarBlue 靈活

alamarBlue 的靈活性是它被廣泛使用并作為增殖劑受到如此高度信任的另一個(gè)主要原因（它在PubMed 上有超過(guò) 3，000 次引用）。訂購(gòu)一種試劑并將其用于各種實(shí)驗(yàn)總是更容易，而不是在方案之間來(lái)回切換。

除了培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞外，alamarBlue 還適用于其他細(xì)胞類(lèi)型，包括細(xì)菌，酵母，真菌和原生動(dòng)物，并且與貼壁或懸浮細(xì)胞兼容。alamarBlue 也可用于細(xì)胞計(jì)數(shù)低的實(shí)驗(yàn)，能夠檢測(cè)培養(yǎng)物中少至 50 個(gè)細(xì)胞！它適合與酚紅一起使用，它只是稍微改變了測(cè)量值。alamarBlue 是廣泛應(yīng)用的不錯(cuò)選擇，包括細(xì)胞增殖測(cè)定、相對(duì)細(xì)胞毒性生物測(cè)定和細(xì)胞因子測(cè)定。

alamarBlue 的靈活性延伸到實(shí)用優(yōu)勢(shì)。由于 alamarBlue 是水溶性的，因此不需要洗滌/固定或提取步驟。如果在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的當(dāng)天無(wú)法讀取板，您可以將它們冷藏在塑料或鋁箔包裝中并在 1-3 天內(nèi)讀取它們，讓您在方便時(shí)讀取板，這可能有助于避免長(zhǎng)時(shí)間在實(shí)驗(yàn)室！

探索 alamarBlue 的魅力

我們已經(jīng)描述了我們喜歡 alamarBlue 的三個(gè)主要原因，以及它如何為您的細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)增加價(jià)值。您可以在我們的專(zhuān)用資源頁(yè)面上找到更多原因，說(shuō)明為什么它可以成為您實(shí)驗(yàn)室的重要試劑，以及使用 alamarBlue 所需的所有工具。

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References

O’Brien J et al. (2003). Investigation of the Alamar Blue (resazurin) fluorescent dye for the

assessment of mammalian cell cytotoxicity. The FEBS Journal, 267, 5421-5426.