本篇為大家?guī)?lái)的是Vector品牌的TrueVIEW自發(fā)熒光淬滅試劑盒常見(jiàn)問(wèn)題解答，如大家想購(gòu)買(mǎi)該試劑盒產(chǎn)品，或咨詢更多關(guān)于該產(chǎn)品的問(wèn)題，技術(shù)方面的支持，都可以聯(lián)系Vector全國(guó)總代理商—欣博盛生物。

1、是否有已發(fā)表的參考文獻(xiàn)描述了TrueVIEW自發(fā)熒光淬滅試劑盒的應(yīng)用？

答：是的。在科學(xué)文獻(xiàn)中有多篇已發(fā)表的參考文獻(xiàn)描述了該試劑盒的應(yīng)用。具體請(qǐng)?jiān)赟P-8400產(chǎn)品詳情頁(yè)的Citations部分中查閱相關(guān)參考文獻(xiàn)。

2、在應(yīng)用TrueVIEW自發(fā)熒光淬滅試劑后的清洗步驟中，我可以使用PBS以外的緩沖液或去垢劑嗎？

答：不可以。我們發(fā)現(xiàn)使用TBS或HEPES緩沖液清洗會(huì)導(dǎo)致TrueVIEW試劑從組織脫落；去垢劑也是不相容的。

3、TrueVIEW工作液可以保存多久？

答：TrueVIEW工作液一旦配制完成后，可在工作臺(tái)或冰箱中(2-8℃)保存約48小時(shí)，可維持其活性或功能。而超過(guò)48小時(shí)，則建議丟棄未使用的TrueVIEW工作液并根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要配制新的工作液。

4、TrueVIEW能減少由脂褐素引起的自發(fā)熒光嗎？

答：TrueVIEW不能減少由脂褐素引起的自發(fā)熒光。TrueVIEW的工作液通過(guò)靜電作用機(jī)制，能顯著減少或消除因使用醛類固定劑而引起的熒光；也能有效減少來(lái)自膠原蛋白、彈性蛋白和紅細(xì)胞等組織成分的熒光。

5、當(dāng)使用TrueVIEW時(shí)，我的組織切片變成藍(lán)色的了，這是正常的嗎？

答：這是正常的。TrueVIEW工作液呈藍(lán)色，會(huì)將組織切片“染成"藍(lán)色，這表示該試劑正在發(fā)生反應(yīng)。不過(guò)切片上的藍(lán)色不會(huì)發(fā)出熒光，不會(huì)干擾免疫熒光應(yīng)用。

6、使用TrueVIEW時(shí)，我可以使用哪些封片劑？

答：兩種TrueVIEW產(chǎn)品(SP-8400和SP-8500)均隨附提供2 mL的VECTASHIELD® Vibrance防熒光淬滅封片劑，建議使用隨附的封片劑以獲得最佳效果。我們發(fā)現(xiàn)，在使用TrueVIEW時(shí)，封片劑對(duì)維持高信噪比起著關(guān)鍵作用。目前，我們暫無(wú)充分的數(shù)據(jù)證明其他供應(yīng)商的封片劑可以和TrueVIEW搭配使用。如果用其他封片劑替代VECTASHIELD® Vibrance，可能會(huì)導(dǎo)致效果不佳。

7、為什么TrueVIEW自發(fā)熒光淬滅試劑要在免疫熒光(IF)完成后才使用，而不是在實(shí)驗(yàn)流程開(kāi)始時(shí)使用？

答：在產(chǎn)品開(kāi)發(fā)過(guò)程中，我們發(fā)現(xiàn)將TrueVIEW淬滅試劑應(yīng)用在標(biāo)準(zhǔn)免疫熒光流程結(jié)束后，能實(shí)現(xiàn)最-理-想的自發(fā)熒光信號(hào)減弱效果。該試劑在封片時(shí)仍保留在組織上，從而實(shí)現(xiàn)持續(xù)的淬滅作用，并且對(duì)特異性的熒光信號(hào)幾乎不產(chǎn)生任何影響。然而，在染色流程非常簡(jiǎn)短的應(yīng)用中(例如使用直接與熒光基團(tuán)偶聯(lián)的一抗)，在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí)應(yīng)用TrueVIEW淬滅試劑可能同樣有效。

TrueVIEW自發(fā)熒光淬滅試劑盒 

VectorLabs公司提供的True VIEW™ Autofluorescence Quenching Kit試劑盒，旨在去除組織切片中由于醛固定、紅細(xì)胞以及膠原蛋白/彈性蛋白結(jié)構(gòu)造成的自發(fā)熒光。該試劑盒包含防熒光淬滅的VECTASHIELD Vibrance Antifade Mounting Media 封片劑(含或不含DAPI兩種)。客戶無(wú)需單獨(dú)購(gòu)買(mǎi)封片劑，經(jīng)濟(jì)、實(shí)用。

SP-8400-15使用案例：

樣本：人胰腺(FFPE)，染色胰島素(綠色)，DAPI(藍(lán)色)。未使用TrueVIEW處理(左圖)；使用TrueVIEW處理(右圖)，自發(fā)熒光明顯減少，特異性染色得以保留。 

SP-8500使用案例：

樣本：人扁桃體(FFPE)，染色AE1/AE3(綠色)，DAPI(藍(lán)色)。未使用TrueVIEW處理(左圖)，使用TrueVIEW處理(右圖)，自發(fā)熒光明顯減少，特異性染色得以保留。

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